2 × Taq Plus PCR blanda

Ofurhreint, mikil afköst og hágæða Taq DNA pólýmerasi.

Taq Plus DNA pólýmerasi er blanda af Taq og Pfu DNA fjölliðu. Það hefur 5'-3 'exonuclease virkni og 3'-5' exonuclease virkni, með einkenni mikillar mögnunar skilvirkni og lágt misræmi. Í samanburði við Taq DNA pólýmerasa hefur Taq Plus DNA fjölliðu kostir aukinnar mögnunarlengdar (einföld sniðmát er hægt að magnast í raun allt að 20kb og flókin sniðmát geta verið allt að 10 kb), góð tryggð osfrv. Í samanburði við Pfu DNA fjölliðu, það hefur kosti hröðrar mögnunarhraða og mikillar hvarfvirkni.

Köttur. Nei	Pakkningastærð
4992791	1 ml
4992792	5*1 ml
4992793	5 × 1 ml

Sendu okkur tölvupóst

Vöruupplýsingar

Tilraunadæmi

Algengar spurningar

Vörumerki

Skilgreining á virkni

1 eining (U) Taq Plus DNA fjölliðuvirkni er skilgreind sem magn ensíms sem þarf til að fella 10 nmól deoxynucleotides í sýruleysanleg efni við 74 ° C innan 30 mínútna með því að nota virkt lax sæði DNA sem sniðmát/grunn.

Gæðaeftirlit

Hreinleiki með SDS-PAGE uppgötvun er meira en 99%; Engin virkni exogenous nuclease greinist; Einstakt afrit í erfðamengi manna gæti magnast á áhrifaríkan hátt; Engin marktæk virkni breytist þegar hún er geymd við stofuhita í eina viku.

Helstu tæknilegu breytur

Taq Plus DNA Polymerase hefur 5'-3 'exonuclease virkni og 3'-5' exonuclease virkni. Hægt er að klóna PCR vörur beint í TA vektor. Ef bæta þarf einræktun skilvirkni er mælt með því að hreinsa PCR vörurnar fyrst og framkvæma A-halun áður en hann er klónaður í TA vektor.

Ein rör Taq Plus PCR blanda (National High-Tech vöru vottun)

■ Taq Plus PCR Mix hefur bætt sérstöðu og næmi PCR viðbragða og getur magnað flókin sniðmát með miklu GC innihaldi, auka uppbyggingu og þess háttar. Hægt er að magna allt að 2 eintök af markmiðssniðmátinu og tryggja nákvæmari tilraunaniðurstöður.

■ Hin einstaka Taq Plus PCR Mix formúla gerir allt hvarfkerfið mjög stöðugt og virknin mun ekki hafa áhrif á endurtekna frystingu eða langvarandi geymslu við 4 ° C.

■ Stöðuga og skilvirka fyrirfram unnna PCR blöndunarlausn getur gert aðgerðina hröð og einföld og dregið verulega úr vinnuafli og sýnatökuvillu. Hágæða PCR aukahlutur og fínstillir er einnig innifalinn í blöndunni, sem dregur úr kröfum um PCR skilyrði.

■ Þessi vara er með bæði litarefni og litarlaust kerfi. Hægt er að nota PCR Mix vörur sem innihalda litarefni með rafgreiningu beint eftir PCR án þess að bæta sýnishorni við.

Umsóknir

Það er almennt notað til að magna upp sniðmát með mikilli tryggð og flókinni uppbyggingu, svo sem hátt GC innihald og auka uppbyggingu. Í flestum tilfellum getur það komið í stað Taq DNA fjölliðu.

Hægt er að aðlaga allar vörur fyrir ODM/OEM. Nánari upplýsingar,vinsamlegast smelltu á sérsniðna þjónustu (ODM/OEM)

Fyrri: 2 × Taq Platinum PCR blanda

Næst: 2 × GC-rík PCR blanda

Notaðu erfðafræðilega DNA sem sniðmát til að magna upp 1 kb brot.
Eftir PCR viðbrögðin skaltu taka 5 μl til að greina rafskaut.

Sp.: Engar mögnunarbönd

A-1 sniðmát

■ Sniðmátið inniheldur prótein óhreinindi eða Taq hemla osfrv .—— Hreinsaðu DNA sniðmát, fjarlægðu prótein óhreinindi eða dragðu út sniðmát DNA með hreinsunarsettum.

■ Afmyndun sniðmátsins er ekki lokið —— Viðeigandi hækkun hitaskynjunarhitastigs og lengja skynjunartíma.

■ Niðurbrot sniðmáts —— Búðu til sniðmátið aftur.

A-2 grunnur

■ Léleg gæði grunna —— Endurgera grunninn.

■ Niðurbrot grunnur ——Færðu háan styrk grunninn í lítið magn til varðveislu. Forðist að frjósa og þíða oft eða við 4 ° C hitaeiningu til lengri tíma.

■ Óviðeigandi hönnun grunna (td grunnlengd er ekki nægjanleg, dimer myndaður á milli grunna o.s.frv.) -Endurhannaðu grunna (forðist myndun grunndimers og auka uppbyggingar)

A-3 mg²⁺einbeitingu

■ Mg²⁺ styrkur er of lítill —— Rétt aukning á Mg²⁺einbeiting: Fínstilltu Mg²⁺ styrkur með röð hvarf frá 1 mM til 3 mM með 0,5 mM bili til að ákvarða ákjósanlegan Mg²⁺ styrkur fyrir hvert sniðmát og grunn.

A-4 Glæðishiti

■ Hátt glæðingarhitastig hefur áhrif á bindingu grunns og sniðmáts. ——Lækkaðu hitaglæðann og fínstilltu ástandið með 2 ° C halla.

A-5 framlengingartími

■ Stuttur framlengingartími —— lengja lengingu.

Sp .: Rangt jákvætt

Fyrirbæri: Neikvæð sýni sýna einnig markbandsröðina.

A-1 mengun PCR

■ Krossmengun á markröð eða magnunarvörum —— Varlega skal ekki setja sýnið sem inniheldur markröðina í pípu í neikvæða sýnið eða hella því út úr skilvinduglasinu. Hvarfefnin eða búnaðurinn ætti að vera sjálfstýrður til að útrýma fyrirliggjandi kjarnsýrum og ákvarða tilvist mengunar með neikvæðum eftirlitstilraunum.

■ Mengun hvarfefnis —— Hreinsið hvarfefnin og geymið við lágt hitastig.

A-2 Primer

■ Mg²⁺ styrkur er of lítill —— Rétt aukning á Mg²⁺ einbeiting: Fínstilltu Mg²⁺ styrkur með röð hvarf frá 1 mM til 3 mM með 0,5 mM bili til að ákvarða ákjósanlegan Mg²⁺ styrkur fyrir hvert sniðmát og grunn.

■ Óviðeigandi grunnhönnun og miðaröðin hefur samsvörun við röð sem ekki er miðuð. —— Endurhönnun grunnur.

Sp .: Ósértæk mögnun

Fyrirbæri: PCR mögnunarböndin eru í ósamræmi við væntanlega stærð, annaðhvort stór eða lítil, eða stundum eiga sér stað bæði sértæk mögnunarbönd og ósértæk mögnunarbönd.

A-1 grunnur

■ Léleg grunnleiki

—— Endurhönnun grunnur.

■ Grunnþéttleiki grunnsins er of hár ——Hækka eðlilega hitastigið rétt og lengja skynjunartímann.

A-2 mg²⁺ einbeitingu

■ Mg²⁺ styrkur er of hár ——Lækkaðu Mg2+ styrkinn rétt: Fínstilltu Mg²⁺ styrkur með röð hvarf frá 1 mM til 3 mM með 0,5 mM bili til að ákvarða ákjósanlegan Mg²⁺ styrkur fyrir hvert sniðmát og grunn.

A-3 hitastöðug fjölliðu

■ Of mikið magn ensíma —— Draga úr ensímmagni með viðeigandi millibili um 0,5 U.

A-4 Glæðishiti

■ Glæðingarhitastigið er of lágt —— Viðeigandi hækkun á glæðingarhitastigi eða notaðu tveggja þrepa glæðingaraðferðina

A-5 PCR hringrásir

■ Of mörg PCR hringrás —— Fækkaðu PCR hringrásum.

Sp .: Pattery eða smear band

A-1 grunnur——Léleg sértækni ——Hönnaðu grunninn að nýju, breyttu stöðu og lengd grunnunnar til að auka sérstöðu hans; eða framkvæma hreiður PCR.

A-2 sniðmát DNA

—— Sniðmátið er ekki hreint —— Hreinsið sniðmátið eða dragið út DNA með hreinsibúnaði.

A-3 mg²⁺ einbeitingu

——Mg²⁺ styrkur er of hár ——Lækkaðu Mg rétt²⁺ einbeiting: Fínstilltu Mg²⁺ styrkur með röð hvarf frá 1 mM til 3 mM með 0,5 mM bili til að ákvarða ákjósanlegan Mg²⁺ styrkur fyrir hvert sniðmát og grunn.

A-4 dNTP

—— Styrkur dNTP er of hár —— Dragðu úr styrk dNTP á viðeigandi hátt

A-5 Glæðishiti

—— Of lágt glæðingarhitastig —— Viðeigandi hækkun á glæðingarhitastigi

A-6 hringrásir

——Af mörgum hringrásum —— Háttu hringrásarnúmerið

Sp .: Hversu mikið sniðmát DNA ætti að bæta við í 50 μl PCR viðbragðskerfi?

Sp.: Hvernig á að magna upp löng brot?

Fyrsta skrefið er að velja viðeigandi fjölliðu. Venjulegur Taq pólýmerasi getur ekki prófarkalestur vegna skorts á 3'-5 'exonuclease virkni og misræmi mun stórlega draga úr skilvirkni brotanna. Þess vegna getur venjulegur Taq fjöllasi ekki magnað markbrot stærri en 5 kb á áhrifaríkan hátt. Taq pólýmerasa með sérstakri breytingu eða annarri hágæða fjölliðu ætti að velja til að bæta framlengingu skilvirkni og mæta þörfum langrar brotamagnunar. Að auki krefst mögnun langra brota samsvarandi aðlögun grunnhönnunar, afmyndunartíma, framlengingartíma, sýrustig buffer osfrv. Venjulega geta grunnir með 18-24 bp leitt til betri uppskeru. Til að koma í veg fyrir skemmdir á sniðmátum, ætti að minnka tímasetninguna við 94 ° C í 30 sekúndur eða minna í hverri lotu og tíminn til að hækka hitastigið í 94 ° C fyrir mögnun ætti að vera styttri en 1 mín. Þar að auki getur stilling hitastigs á um það bil 68 ° C og hönnun framlengingartíma í samræmi við hraða 1 kb/mín tryggt skilvirka mögnun langra brota.

Sp.: Hvernig á að bæta mögnunartryggni PCR?

Hægt er að minnka villuhlutfall PCR mögnunar með því að nota ýmsa DNA fjölliður með mikilli tryggð. Meðal allra Taq DNA fjölliða sem fundist hafa hingað til hefur Pfu ensím lægsta villuhlutfallið og hæsta tryggðina (sjá meðfylgjandi töflu). Til viðbótar við ensímval geta vísindamenn enn frekar dregið úr PCR stökkbreytingarhraða með því að fínstilla viðbragðsaðstæður, þar með talið að hámarka biðmassasamsetningu, styrk hitastöðugrar fjölliðu og fínstilla PCR hringrásarnúmer.

Skrifaðu skilaboðin þín hér og sendu okkur